Elektroforezė yra laboratorinė technika, atliekama siekiant atskirti molekules pagal jų dydį ir elektrinį krūvį, kad būtų galima nustatyti ligų diagnozę, patikrinti baltymų ekspresiją ar nustatyti mikroorganizmus.
Elektroforezė yra paprasta ir nebrangi procedūra, naudojama laboratorijoje ir tyrimų projektuose. Pagal elektroforezės tikslą, norint nustatyti, pavyzdžiui, diagnozę gali tekti atlikti kitus tyrimus ir egzaminus.
Kam tai
Elektroforezė gali būti atliekama keliems tikslams - tiek atliekant mokslinius tyrimus, tiek diagnozuojant, nes tai paprasta ir nebrangi technika. Taigi elektroforezę galima atlikti:
- Identifikuokite virusus, grybus, bakterijas ir parazitus, ši programa dažniau naudojama mokslinių tyrimų projektuose;
- Tėvystės testas;
- Patikrinkite baltymų išraišką;
- Nustatyti mutacijas, kurios gali būti naudingos, pavyzdžiui, diagnozuojant leukemijas;
- Išanalizuoti cirkuliuojančio hemoglobino tipus, kurie yra naudingi pjautuvinės anemijos diagnozei nustatyti;
- Įvertinkite baltymų kiekį kraujyje.
Atsižvelgiant į elektroforezės tikslą, gali prireikti atlikti kitus papildomus tyrimus, kad gydytojas galėtų diagnozuoti.
Kaip tai daroma
Elektroforezei atlikti reikalingas gelis, kuris gali būti poliakrilamidas arba agarozė, priklausomai nuo objektyvo, elektroforezės buferis ir talpa, molekulinės masės žymeklis ir fluorescenciniai dažai, be UV ar LED šviesos įrangos, dar vadinamos transiliuminatoriumi.
Paruošus gelį, reikia įdėti konkretų daiktą, kad padarytumėte gelio šulinius, liaudiškai vadinamus šukomis, ir leiskite geliui sustingti. Kai gelis bus paruoštas, tiesiog tepkite medžiagas į duobutes. Tam reikia įdėti molekulinės masės žymeklį į vieną iš duobių, teigiamą kontrolę, kuri yra medžiaga, kuri yra žinoma, kas tai yra, neigiamą kontrolę, kuri garantuoja reakcijos pagrįstumą, ir mėginius, kuriuos reikia analizuoti. Visi mėginiai turi būti sumaišyti su fluorescuojančiais dažais, nes tokiu būdu galima vizualizuoti transiliuminatoriaus juostas.
Gelis su mėginiais turi būti dedamas į elektroforezės talpyklą, kurioje yra specifinis buferinis tirpalas, tada prietaisas įjungiamas taip, kad būtų elektros srovė ir atitinkamai potencialų skirtumas, kuris yra svarbus dalelėms atskirti pagal pagal jų apkrovą ir dydį. Elektroforezės veikimo laikas skiriasi priklausomai nuo procedūros tikslo ir gali trukti iki 1 valandos.
Praėjus nustatytam laikui, galima pamatyti elektroforetinio važiavimo per transiliuminatorių rezultatą. Kai gelis dedamas į UV ar LED šviesą, galima vizualizuoti juostos modelį: kuo didesnė molekulė, tuo mažiau ji migruoja, priartėdama prie šulinio, tuo tarpu kuo šviesesnė molekulė, tuo didesnis migracijos potencialas.
Kad reakcija būtų patvirtinta, būtina, kad teigiamos kontrolės juostos būtų vizualizuotos ir kad neigiamoje kontrolėje niekas nebūtų vizualizuota, kitaip tai rodo, kad buvo užteršimas, ir visas procesas turi būti pakartotas.
Elektroforezės tipai
Elektroforezė gali būti atliekama įvairiais tikslais ir, atsižvelgiant į jos paskirtį, gali būti naudojami keli gelio tipai, dažniausiai poliakrilamidas ir agarozė.
Elektroforezė mikroorganizmams nustatyti dažniausiai atliekama tyrimų laboratorijose, tačiau diagnostikos tikslais elektroforezė gali būti naudojama hematologinėms ligoms ir ligoms, atsirandančioms didėjant baltymų kiekiui, nustatyti, kurios yra pagrindinės elektroforezės rūšys:
1. Hemoglobino elektroforezė
Hemoglobino elektroforezė yra laboratorinė technika, atliekama siekiant nustatyti įvairius kraujyje cirkuliuojančius hemoglobino tipus, leidžiančius nustatyti su hemoglobino sinteze susijusias ligas. Hemoglobino tipas nustatomas elektroforezės būdu esant tam tikram pH, idealiu atveju - nuo 8,0 iki 9,0, patikrinant juostų modelį, kurį galima palyginti su įprastu modeliu, leidžiančiu nustatyti nenormalius hemoglobinus.
Už ką tai daroma: Hemoglobino elektroforezė atliekama tiriant ir diagnozuojant su hemoglobino sinteze susijusias ligas, tokias kaip pjautuvo ląstelių anemija ir hemoglobino C liga, be to, kad ji naudinga diferencijuojant talasemiją. Sužinokite, kaip interpretuoti hemoglobino elektroforezę.
2. Baltymų elektroforezė
Baltymų elektroforezė yra egzaminas, kurio paprašė gydytojas, kad įvertintų kraujyje cirkuliuojančių baltymų kiekį ir taip nustatytų ligas. Šis tyrimas atliekamas iš kraujo mėginio, kuris centrifuguojamas, kad gautų plazmą - kraujo dalį, kurią, be kitų medžiagų, sudaro baltymai.
Po elektroforezės galima vizualizuoti juostų modelį ir vėliau grafiką, kuriame nurodomas kiekvienos baltymų frakcijos kiekis, kuris yra pagrindinis diagnozės nustatymas.
Kam tai daroma: baltymų elektroforezė leidžia gydytojui ištirti daugybinės mielomos, dehidratacijos, cirozės, uždegimo, kepenų ligų, pankreatito, vilkligės ir hipertenzijos atsiradimą pagal juostos schemą ir tyrimo ataskaitoje pateiktą grafiką.
Suprasti, kaip tai daroma, ir kaip suprasti baltymų elektroforezės rezultatą.
ar informacija buvo naudinga?
taip ne
Jūsų nuomonė yra svarbi! Parašykite čia, kaip galime patobulinti savo tekstą:
Turite klausimų? Jei norite atsakyti, spustelėkite čia.
El. Paštas, į kurį norite gauti atsakymą:
Patikrinkite patvirtinimo el. Laišką, kurį jums išsiuntėme.
Tavo vardas:
Apsilankymo priežastis:
--- Pasirinkite savo priežastį --- LigaGyvenk geriauPagalėk kitam asmeniui Įgyk žinių
Ar esate sveikatos specialistas?
NeFiziologasFarmacinė slaugytojaMitybos specialistasBiomedicinosFizioterapeutasGrožio specialistasKitas
Bibliografija
- ENCIKLOPĖDIJŲ BIOSFERA, ŽINANTYS MOKSLINĮ CENTRĄ. Elektroforezė: sąvokos ir pritaikymas. 2015. Prieinama :. Žiūrėta 2019 m. Rugsėjo 24 d
- KASVI. Kas yra elektroforezė ir kodėl ji yra svarbi?. Yra: Žiūrėta 2019 m. Rugsėjo 24 d
.png)
